血清杀菌试验(Serum Bactericidal Activity, SBA)是一种用于评估血清中抗体在补体介导下杀菌活性的体外检测方法。以下是关于SBA的详细介绍:
SBA基于抗体依赖性、补体介导的杀菌机制。当血清中的抗体与目标细菌表面的抗原结合后,补体系统被激活,最终导致细菌的溶解和死亡。具体来说,抗体通过其Fc段与补体C1q结合,激活补体经典途径,形成膜攻击复合物(MAC),导致细菌细胞膜破裂,细菌死亡。
SBA方法
准备材料:包括待测血清、目标细菌菌株、外源补体(如兔补体或人补体)。
血清稀释:将血清进行一系列稀释,通常为2倍或5倍稀释。
孵育:将稀释后的血清与目标细菌和补体混合,在适宜的温度下孵育一定时间。
检测存活细菌:孵育结束后,通过平板培养计数存活的细菌菌落形成单位(CFU),以计算杀菌滴度。
计算杀菌滴度:以能够杀死50%以上细菌的血清最高稀释倍数的倒数作为杀菌滴度。
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